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北京生子助孕中心，微生物实验开始前，玻璃器皿的清洁与灭菌处理

时间：2023-02-09 10:54 来源：未知阅读次数：548

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一、玻璃器皿的清洁

1.新购进玻璃器皿的处理新购进玻璃器皿上一般附有游离碱性物质，不能直接使用，应在2%盐酸溶液中浸泡几小时，把表面的碱性中和后，再用肥皂水或洗衣粉洗刷玻璃器皿的内外，然后用清水反复冲洗，来出去残留的酸质，最后用蒸馏水冲洗干净。2.对反复使用的玻璃器皿的处理常用的玻璃器皿，如平皿、试管、烧杯、烧瓶等，要先高压灭菌（121℃、30min），趁热倒掉容器中的废弃物，以温水冲净，再加5%肥皂水煮沸5min，然后趁热洗刷干净，最后用蒸馏水冲洗干净。3.载玻片与盖玻片新买的载玻片与盖玻片，以新购进的玻璃器皿处理方法清洗；用过载玻片的可以放入2%来苏尔或5%石碳酸溶液中浸泡好后，取出后水洗，再用5%肥皂水煮沸20min，然后用毛刷蘸肥皂刷洗，最后用清水反复冲洗干净。载玻片浸泡在95%的酒精1min，取出用软布擦干，再放入盛蒸馏水的烧杯中浸泡5min以除去溶剂，烘干备用。4.清洁剂的种类及使用玻璃仪器常用的清洁剂是洗衣粉、去污粉、肥皂、洗液、有机溶剂等。对于可以用刷子直接刷洗的玻璃器皿，可用肥皂、洗衣粉、去污粉的水溶液直接刷洗。对于蒸馏瓶、容量瓶、移液管、滴定管等不容易用刷子刷的仪器，用洗液洗。洗液还可以用来洗刷子刷不下的顽固污渍和久置不用的器皿，洗刷顽固污渍时，要有足够的浸泡时间。使洗液与仪器表面的污物充分发生化学作用；有机溶剂可以用来去除器皿表面的油脂，如甲苯、二甲苯、汽油等；有的也可利用能与水混合又易挥发的特点去除仪器上的水，如酒精、乙醚等。5.玻璃仪器的洗涤方法与要求（1）人工清洗：带干净的手套或洗净手，用清水冲洗器皿；选择合适的洁净剂洗刷或浸泡；先用自来水冲洗，再用蒸馏水顺壁冲洗充分震荡，直至玻璃器皿上挂不住水珠，用指示剂检查为中性。（2）超声波清洗：加入清洗剂，利用清洗剂的化学作用和超声波的物理作用，达到对玻璃器皿的成分清洗的目的，超声波在30℃~40℃时净化效果最好，在实际工作中一般采用40℃~60℃的工作温度。用清洗剂洗刷完后，再用清水洗，直至达到玻璃器皿清洗要求。6.玻璃器皿洗刷应注意的问题含油脂（石蜡油、凡士林）的玻璃器皿要单独清洗，洗刷前尽量先去油，单独高压灭菌后，趁热倒掉污物，然后将玻璃器皿倒置于铺有粗吸水纸的铁丝筐内，放于100℃烘箱内0.5h，取出后再放入5%碳酸氢钠水中煮两次，然后用肥皂水刷洗干净，最后用蒸馏水冲洗干净。用来做荧光分析的玻璃器皿仪器应避免用洗衣粉洗，因洗衣粉中的荧光增白剂会影响实验结果。

二、玻璃器皿的包扎

玻璃器皿在灭菌前，应用纸或金属桶等包裹，防止消毒灭菌后，被外界的杂菌所污染。1.烧杯、三角瓶、试管等可用做好的合适的棉塞塞好，外面再用纸和细绳包扎一下，以防棉塞掉下。烧杯可用纸和绳包扎即可。2.培养皿可用牛皮纸或双层报纸单个或数个包成一包，也可直接放入特制的培养皿灭菌金属桶内，加盖灭菌。（1）将12个玻璃培养皿按图2~4个堆放在牛皮纸或双层报纸（4开，39cm×54cm）上，两头拧紧。（2）用双手拇指和食指将纸边裹在平皿堆表面，同时用双手的无名指和小指挤紧平板。将平皿堆向前滚，顺势将纸紧紧包裹在平皿堆的外面，整个推进的过程中双手无名指和小指都要挤紧平板。包裹的松紧程度直接决定最终的包扎质量。（3）当纸全部包裹在平板堆表面后，将平板堆数值放在桌面上。将平板堆两头的纸依次叠好别紧。3.移液管在包装前先用长针等在上口处塞少量的棉花（勿用脱脂棉），既可防止吸取液体时，液体被吸出造成污染，又可对吹入吸管的空气起一个过滤作用。塞入的棉花的量要适宜，距管口约0.5cm左右，棉花的长度约1cm~1.5cm。棉花要塞得松紧适度，吹时既能通气又不能使棉花下滑。移液管可用纸分别卷包，也可用多支包成一束或装入金属桶进行灭菌。单支移液管的包装可先将牛皮纸（或报纸）剪成约5cm的长纸条，再将移液管的尖端放在纸的一段，约成45°角，折叠包好尖端，一手拿管身，一手压紧管和纸，在桌上向前搓滚，使纸成螺旋状把管包起来，上端剩余的纸条折叠后打结即可。

三、玻璃器皿的灭菌

1.干热灭菌玻璃器皿干燥包装后可在电热干燥箱内进行干热灭菌，加热160℃~180℃，维持2h。包装放置在干燥箱内，不要和箱壁接触，打开电源后，先把箱顶部的通气孔打开一点，让湿空气逸出，当箱内温度达到100℃后，关闭通气孔。调节温度控制旋钮到设定的温度，升温至所设定的温度时，维持1h~2h进行灭菌。灭菌完成后，关掉电源，冷却到60℃时，再打开箱门。温度控制旋钮归位，并打开顶部通气孔。灭菌后的器皿，要1周内用完。2.高压蒸汽灭菌在高压蒸汽灭菌器内进行，是一种最普遍的、有效的灭菌方法。

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